Estoy en el proceso de extracción del DNA viral de LuIII para poder cortar el DNA con enzimas de restricción y poder analizar los fragmentos generados. Utilizamos un “non-Hirt method” para extraer virus puro, sin embargo, este procedimiento no rindió mucho DNA lo que decidimos repetir la infección utilizando un “Hirt method”. La diferencia entre ambos procedimientos es que en el non-Hirt dejamos que ocurran los efectos citopáticos en un 100%, por lo tanto se deja el cultivo celular con virus por más tiempo que haciéndolo con Hirt. Otro asunto es que con Hirt inducimos que la célula infectada estalle para sacar virus y todas las proteínas incluyendo intermediarios de replicación y en el non-Hirt teóricamente se recupera solamente DNA viral y no proteínas virales. En la práctica, el Hirt tiene mayor rendimiento que el non-Hirt, aunque sea más impuro el DNA viral (el “smear” en la gel lo indica).En el laboratorio, el trabajo en equipo es esencial, especialmente en el mantenimiento. Cada uno de los miembros del laboratorio tiene unas labores en el laboratorio, que se van rotando de semana en semana. Aunque parezca irrelevante, es muy importante mantener todo en su sitio en el laboratorio. Hay que tener los envases bien lavados y autoclaveados, al igual que las puntas, el agua destilada, los microtubos, entre otros. A mí me toca llenar los envases de agua y cambiar el agua todas las semanas.Lo que me gusta del lab es que los estudiantes graduados siempre están dispuestos a ayudar en cualquier pregunta que tenga sobre algún instrumento, procedimiento que necesite. El apoyo de ellos y de la técnica de laboratorio me da la seguridad y la confianza de proseguir con mis experimentos. Krystal Colon y yo trabajamos mucho en equipo porque cuando tenemos que hacer un gel, usualmente compartimos fosas o uno prepara el gel y el otro limpia, ejemplos así. La confianza que tenemos rompen las limitaciones. He visto en muchos laboratorios esa falta de confianza, de que fulano me va a arruinar mis experimentos así que prefiero trabajar solo; yo creo que este tipo de comentario es un factor limitante del progreso en un laboratorio de investigacion.Obstáculos en trabajar en equipo? Creo que solo habría obstáculos si alguno de los miembros del laboratorio son irresponsables en no cumplir con las normas, trabajos de la semana o no viniese al laboratorio porque afectaría la meta común, pero hasta ahora tenemos un buen equipo de trabajo y nos respaldamos uno al otro. No hay conflictos entre ningún miembro del laboratorio lo que promulga un ambiente de respeto, confianza y de amistad. ¡Me encanta mi lab y no lo cambiaría por ninguno!
Buenas a todos, soy estudiante subgraduado del Recinto Universitario de Mayagüez y trabajo con la doctora Diffoot en el laboratorio de Virología en el Departamento de Biología. Llevo trabajando con ella desde el semestre pasado. Estoy trabajando con el virus LuIII y sus conformaciones en su proceso de replicación. Siempre me ha interesado la patogénesis de los virus desde un punto de vista clínico y científico lo que me llevó a este lab. Para suerte de todos, tenemos una técnica de laboratorio excelente que nos guía en todos los materiales y procedimientos que necesitamos para llevar a cabo nuestra investigación. El semestre pasado aprendí a hacer cultivos de tejidos, infección, extracción, aprendí a utilizar un program que te predice los cortes con enzimas de restriccióm, hice por primera vez un Southern Blot, entre otras cosas. Tengo compañeros de trabajo excelente; me encanta el ambiente de mi laboratorio, es bastante espacioso y cómodo para trabajar. Ahora somos alrededor de 5 subgraduados y 4 graduados más o menos. Para mí, el ambiente de trabajo es esencial para la productividad al igual que el trabajo en equipo y aquí he encontrado un lugar donde puedo encajar perfectamente con estas dos condiciones.
Este semestre tenemos propuesto repetir los experimentos del semestre anterior utilizando un non-Hirt method de infección.
