Progreso del 25 de octubre

Durante el mes de octubre, me dedique a la extraccion de los DNA del pGlu883 Xba Reverse y el pGlu883 Xba AT- o p5. Esto se logra por medio del corte de enzimas de restriccion, incluyendo BamHI. queremos aislar suficiente DNA para poder llevar a cabo ligacion al vector de GFP y poder medir eficiencia de replicacion utilizando la fluorescencia. Ante el problema del vector de GFP, mi mentora tomo la decision de eliminar este vector regalado y ordeno que se comprara un vector de GFP nuevo, lo que fue una decision dificil, ya que significa que el tiempo que inverti caracterizando el GFP, fue en vano… Mientras a finales de octubre se ordeno ese vector de GFP nuevo, lleve acabo varios cortes con BamHI para obtener los DNA, y purificarlos. Surgio un problema con el pGlu Reverse ya que no pude extraer suficiente DNA para extraccion del “Gel extraction” lo que implica que tengo que repetir la extraccion del reverse. El pGlu AT- fue una extraccion existosa. Se pudo lograr un 60% de las metas.
Necesitamos tener ambos DNA para proseguir a la ligacion donde sacariamos el origen de replicacion del GFP y lo reemplazariamos por nuestro DNA. Bueno les dire mas detalles el proximo mes! Hasta luego